雪膽(Hemsleya sinesis Cogn)為葫蘆科雪膽屬 植物,其有效部分為塊根。其提取物具有抗腫瘤、廣 譜抗菌、抗病毒、抗炎鎮咳、抗肝炎等作用。 為驗證雪膽口服液對雞大腸桿菌的防治效果作 用,根 據中華人民共和國農業部公告——獸 用 中 藥 、天 然藥物臨床試驗技術指導原則(第 1596 號)中臨 床擴大試驗要求,對雪膽口服液的臨床療效驗證, 選擇某養殖場飼養的海蘭白殼蛋雞大腸桿菌病自 然病例作為研究對象, 應用雪膽口服液按 4mL/L 飲水添加,連續飲用 5d,觀察防治效果。
1 材料與方法
1.1 試驗動物
海蘭白殼蛋雞 1400 只,按常規免 疫 程 序 免 疫 疫 苗,養 至 42 日 齡 時,雞 只 表 現 精 神 萎 靡,羽 毛 逆 立,扎 堆,食 欲 廢 絕,腹 瀉,糞 便 呈 黃 綠色水便,初步懷疑大腸桿菌病。
1.2 病例診斷和分組
對 上 述 雞 群,選 擇 癥 狀 典 型病例,進行剖檢和細菌分離、生化鑒定。 將 1400 只隨機分為中藥組及對照組兩組,每 組約 700 只,兩組給予同樣的飼養管理條件。 Ⅰ組 為中藥組, 給予濃度為推薦劑量的雪膽口服液自由飲水, 連續給藥 5d; Ⅱ組為硫酸新霉素可溶性 粉 組 , 按 推 薦 劑 量 (0.5g/L) 飲 水 給 藥 , 連 續 給 藥 5d,每天觀察并記錄雞只的精神狀況。 分組及給藥 情況見表 1。
1.3 試驗藥物與化學試劑
雪 膽 口 服 液,德 州 神 牛藥業有限公司中試生 產,批 號:20160412。 硫 酸 新霉素可溶性粉,購于河南森隆獸藥有限公司,批 號:20160826;麥 康 凱 瓊 脂、營 養 瓊 脂、細 菌 微 量 生 化反應管,購于杭州天和微生物試劑有限公司;營 養肉湯,購于北京雙旋微生物培養基制品廠。
1.4 試驗儀器
電熱鼓風干燥箱,北 京 市 永 光 明 醫 療 儀 器 廠 ;生化培養箱(博迅SPX-250B-Z),上 海 博 迅實業有限公司醫療設 備 廠 ; 恒溫培養振蕩器 (ZHWY-103D), 上海智城分析儀器 制造有限公 司;電子天平(MR200A),上海第二天平儀器廠;超 凈工作臺(LGJ-10),北京四環科學儀器廠。 TGL16 高速臺式電動離心機, 金壇市杰瑞爾電器有限公司。
1.5 檢測指標
每天觀察記錄試驗雞的臨床癥 狀變化、死亡、增 重情況,計算各組的保護率、治愈 率、死亡率(統計方法同試驗性臨床試驗)。
1.6 數據分析
對采用 SPSS 17 軟件對試驗數據 進行顯著性檢驗,死 亡 率、保 護 率、治 愈 率 采 用 卡 方 x2 檢驗。 兩組的 X2 檢驗: X2 = (ad-bc)2 n/(a+ b) (c+d) (a+c) (b+d),其 中 I 組 存 活 數 a,死 亡 數 c;II 組存活數 b,死亡數 d。 n 為兩組動物總數。 X2 >6.63 為差異顯著,X2 <3.84 表示差異不顯著。
2 結果與分析
2.1 病例診斷
2.1.1 剖檢變化
對典型病例進行剖 檢, 可 見 到 大腸桿菌病的病理變化:肌 肉 脫 水,顏 色 暗 紅;肝 臟腫脹, 有散在 的出血點, 部分雞有輕微的心包 炎、肝周炎表現。
2.1.2 細菌分離、 鑒定
從病死雞的肝 臟 采 集 病 料,接種于麥康凱瓊脂培養基,培 養 24h 后,可 見 紅色菌落。 挑取單個菌落,接種肉湯增菌后,進行 生化試驗, 生化鑒定結果符合大腸桿菌的生物學 特征。
2.2 防治效果
觀察兩種藥物對大腸桿菌病雞的防治效果 , 新霉素組用藥第 2 天后癥狀明顯好轉,腹瀉停止, 飲食欲有所恢復, 第 3 天以后沒有再出現死亡 現 象,中藥組在用藥后癥狀稍見好轉,部分雞 精神萎靡,死亡現象一直持續到第 4 天,死亡 數 為 93 只。 統計兩組藥物飲水給藥后的 1 周 內 的 治 愈 率、保 護率、死亡率各項指標,經統計學分析均為差異顯 著(P<0.05)。 說明雪膽口服液對雞大腸桿菌病的 防治效果不及新霉素。
3 結論
雪膽口服液對雞大腸桿菌自然病例的治療保 護率為 86.71%,但效果不及新霉素(95.57%)。
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