1 材料與方法
超凈工作臺(SW-CJ-1FD),上海博實業有限公司醫療設備廠產 品;凝 膠 成 像 儀 (GelDocXR)、梯 度 PCR 儀(T100),美 國 Bio-Rad 公司產品;高速離心機(JW-2017H),安徽嘉文儀器 裝備有限公司產品;超低溫冰箱(DW-HL328),中科 美菱低溫 科 技 有 限 責 任 公 司 產 品;恒 溫 搖 床(HZ- 2011KA),太倉市華利達實驗設備有限公司產品;電 泳儀(DYY-6C),北京市六一儀器廠產品。
2 結果
本試驗對3個候選的 DNA 條形碼片段cpn60、 recA 和ppsA 進行 PCR 擴增和瓊脂 糖 凝 膠 電 泳 檢 測。候 選 基 因 的 長 度 在530bp~1065bp。 其中recA 序 列 最 長,約 為1065bp;ppsA 序 列 最 短,長度約為530bp;cpn60序列長度約為555bp。 GC含量 ppsA 基 因 最 高,為 65%;其 次 是recA 和 cpn60,分別為59.1%和57.2%。序列變異位點數可 反 映 序 列 的 變 異 程 度,cpn60 變 異 位 點 數 最 多 (147);變異位點占總長度的比例也最高(27.68%), 顯 著 高 于 recA(12.42%)和 ppsA(2.3%),提 示 cpn60基因可 為 物 種 提 供 更 多 的 鑒 別 信 息。此 外, cpn60基 因 的 PCR 擴增測序成功率也是 最高的 (75.8%),更容易獲得。
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