膏方又稱膏劑，是中醫(yī)藥的 8 種劑型（丸、散、膏、 丹、酒、露、湯、錠）之一，它以大規(guī)模復(fù)方湯劑為基礎(chǔ)， 經(jīng)濃縮煎煮后加入蜂蜜或阿膠后制成的一種濃稠的半 固體劑型。參茸鹿胎膏為棕褐色塊狀物，具有輕微的 腥味和略帶咸味的味道，該藥物由人參、當歸、川穹、鹿 茸、鹿胎、化橘紅、附子（制）等 45 種中藥組成，其主要功能為補虛生精、益腎壯陽的功效，主治經(jīng)血不足、婦 女虛寒。

1 材料與儀器 

1.1 材料與試劑 

參茸鹿胎膏、人參、當歸、川芎（吉林省天強制藥有 限公司）；參茸鹿胎膏-2、參茸鹿胎膏-3、參茸鹿胎膏-4 （委托吉林省天強制藥有限公司制備，除分別不含有人 參、鹿茸和化橘紅外，其他原料和生產(chǎn)工藝與參茸鹿胎 膏完全相同）；硅藻土（靈壽縣匯資礦產(chǎn)品有限公司）； 柚皮苷標準品、人參皂苷 Rg1 標準品、烏頭堿標準品 （中國藥品生物制品檢驗所）；硅膠 G（青島海洋化工 廠）；三氯甲烷、甲醇、正丁醇、氨水試液、石油醚（分析 純）；水為純化水。 

1.2 儀器 

Agilent 1200series 高效相色譜儀（美國安捷倫公 司）；Shimadzmn UV-2450 紫外分光光度計、FA1104 天 平（上海精密科學儀器有限公司）；RE-52-99 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 儀（上海亞榮生化儀器廠）；博迅GZX-9140MBE 電熱鼓風 干燥箱（上海博訊實業(yè)有限公司）；D ZF-6050 真空干 燥箱（上海博訊實業(yè)有限公司）； 

2 方法與結(jié)果 

2.1 人參成分的鑒定 

2.1.1 參茸鹿胎膏供試溶液的制備

取參茸鹿胎膏樣 品 10 g，切碎置于錐形瓶中，加入 10 g 硅藻土，混勻、 研磨，加入 100 mL 甲醇，加熱回流過濾 30 min，將濾 液蒸發(fā)干燥，加入 30 mL 水溶解殘渣后，倒入分液漏 斗中，用 50 mL 三氯甲烷對殘渣進行振搖提取，放置 待分層后棄去三氯甲烷溶液，保留水溶液層，用 20 mL 水飽和的正丁醇提取水溶液 3 次，合并提取液，40 mL 氨水試液洗滌，除去氨水層，將正丁醇層蒸干，藥物殘渣用 1 mL 甲醇溶解作為供試品溶液。 

2.1.2 人參陽性供試夜的制備 

取人參0.5g，加入40mL 三氯甲烷，加熱回流 1 h，棄去三氯甲烷液，將藥渣中的 溶劑揮發(fā)干凈，然后于殘渣中加入 0.5 mL水進行攪拌 加濕，再于殘渣中加入 10 mL 水飽和正丁醇溶液，將 溶液進行超聲處理約 30 min，吸取超聲處理后的上清 溶液，加入 3 倍量氨試液，將其振搖均勻，然后將其放 置，待分層后，取出上層液并蒸發(fā)至干，再于殘渣中加 入 1 mL 甲醇溶液，用甲醇溶液將殘留物進行溶解，作 為供試品溶液。 

2.1.3 人參皂苷Rg1 標準液的制備 

取人參皂苷Rg1 對照品，于對照品中加入一定量的甲醇溶液，將其制備 成每 1 mL 含 1 mg 的溶液，作為人參皂苷 Rg1 標準品 溶液。 

2.1.4 陰性對照液的制備 

取參茸鹿胎膏-2 樣品 10 g， 并按照“2.1.1”項下相同的方法制備成陰性對照溶液。 

2.1.5 薄層色譜分析 

根據(jù)薄層色譜法（中國藥典 2015 年版一部附錄Ⅵ B）試驗，吸取上述溶液各 5 μL， 在同一硅膠 G 薄層板上點樣，用三氯甲烷-乙酸乙酯甲醇-水（15∶40∶22∶10）放置在 10 ℃以下的下層溶 液作為展開劑展開，用 10%硫酸乙醇溶液進行噴霧， 并在 105 ℃加熱至斑點顯色清晰。在供試品的色譜 中，在與對照藥材和對照品色譜相對同的位置上，分別 顯相同顏色的斑點，且斑點清晰，表明陰性對照無干 擾，可以定性鑒別為該處方中的人參，結(jié)果見圖 1。

2. 2 當歸和川芎成分的鑒別 

2.2.1 參茸鹿胎膏供試溶液的制備 

取參茸鹿胎膏樣 品 10 g，切碎置于錐形瓶中，加入 30 mL乙醚浸泡至過 夜，將浸泡完全的樣品進行超聲處理約 10 min，超聲處 理后將其過濾，將濾液進行濃縮，直至濃縮約 2 mL，將 其作為供試品溶液。 

2.2.2 當歸、川芎陽性供試液的制備 

另外取 1 g 當 歸對照藥材以及 1 g川芎對照藥材，加入 20mL乙醚浸 泡，采用“2.2.1”項下同樣的方法制備出對照藥材溶液。 

2.2.3 陰性對照液的制備

取參茸鹿胎膏-3 樣品 10 g， 并按照“2.2.1”項下相同的方法制備成陰性對照溶液。 

2.2.4 薄層色譜分析 

根據(jù)薄層色譜法（中國藥典 2015 年版一部附錄Ⅵ B）試驗中提到的方法，吸取上 述 4 種溶液各 2 L，置于同一硅膠Ｇ薄層板，以展開 劑：正己烷-乙酸乙酯（9∶1）展開，在紫外光燈（365 nm） 下檢視。在供試品的色譜中，在與對照藥材色譜相 同的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，且斑點清晰，表 明陰性對照無干擾，可以用于定性鑒別該處方中的當 歸和川芎。 

2.3 柚皮苷含量測定 

2.3.1 供試品溶液制備

取參茸鹿胎膏樣品 5 塊，切 碎后混合均勻，精密稱量置于錐形瓶中，浸泡過夜后， 超聲處理約 40 min，取出并稱定重量，用 50%乙醇補 足失掉的重量，搖勻同時濾過，取濾液，即制備成供試 品溶液。 

2.3.2 陽性對照品溶液制備

精密稱取柚皮苷對照品 適量，加甲醇配制成每 1 mL 含 70 μg 的溶液，振搖均勻即制備成了對照品溶液。 

2.3.3 陰性樣品溶液制備 

取參茸鹿胎膏-4，并按照 “2.3.1”項下相同的方法制備成陰性對照溶液。

2.3.4 色譜分析與含量測定

 色譜柱：AgilentC1（8 4.6mm 200 mm，5 μm）；流動相：甲醇-0.1%冰醋酸（31∶69）； 流速：1.0 mL/min；柱溫：35 ℃；檢測波長：283 nm；理論 板數(shù)按柚皮苷峰計算應(yīng)不低于 3 000。

3 結(jié)論與討論 

采用高效液相色譜法測定參茸鹿胎膏中柚 皮苷的含量，在研究流動相的選擇過程中，對多種流動 相以及流速進行了考察，曾試用乙腈 0.088%甲酸水 溶液（23.3∶76.7）、甲醇 0.2%冰醋酸、甲醇-醋酸-水 （30∶4∶70）作為流動相，但制劑中柚皮苷色譜峰 分度較差，最終采用甲醇 0.1%冰醋酸（31∶69）作為 本試驗流動相，通過對色譜條件的考察及方法學的考 察證明，該操作可行，精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性和準確性 良好，可以作為本試驗的流動相。

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